人原代造血干原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3253 |
種屬來源 | 人 | 組織來源 | 外周血 |
生長特性 | 懸浮生長 | 形態(tài)特征 |
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形態(tài):
培養(yǎng)基:人造血干細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞基本屬性:
種屬來源:人
組織來源:外周血外周血
生長特性:懸浮生長
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chǎn)品貨期:3-4周
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹::造血干細(xì)胞是骨髓中的干細(xì)胞,具有自我更新能力并能分化為各種血細(xì)胞的前提細(xì)胞,最終生成各種血細(xì)胞成分,包括紅細(xì)胞,白細(xì)胞和血小板。造血干細(xì)胞需要根據(jù)機(jī)體的生理需求適時(shí)的補(bǔ)充血液系統(tǒng)各個成熟細(xì)胞組分。同時(shí)在損傷、炎癥等應(yīng)激狀態(tài)下,造血干細(xì)胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細(xì)胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細(xì)胞移植廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實(shí)體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細(xì)胞瘤,乳腺癌,小細(xì)胞肺癌,主要應(yīng)用于常規(guī)治療失敗或復(fù)發(fā)難治以及具有不良預(yù)后因素的患者。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時(shí)間短,冷消化時(shí)間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計(jì)數(shù)?:將消化后的細(xì)胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
H7N9 病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | 4T1 (小鼠乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
EB病毒(EBV)核酸檢測試劑盒 | 293ET (人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) |
EB病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | 293F (STR)人胚腎細(xì)胞 |
H5N1熒光定量PCR檢測試劑盒(不含反轉(zhuǎn)錄) | 293F (人胚腎細(xì)胞) |
H7N9 病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | 293FT (人胚腎細(xì)胞) |
HIV-1/HIV雙重染料法熒光定量PCR試劑盒 | 293FT 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
HN熒光定量PCR檢測試劑盒(不含反轉(zhuǎn)錄) | 293FT人胚腎細(xì)胞 |
JC病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 293FT人胚腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
MTHFR和MTRR基因檢測試劑盒(PCR熔解曲線法) | 293T-17 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
PCR級MgCl2溶液(氯化鎂溶液),25 mM | 293T/RFP (STR)人胚腎細(xì)胞 |
PCR級MnCl2溶液(氯化溶液),25 mM | 293H (人胚腎細(xì)胞) |
PCR檢測試劑盒 | 293T [HEK-293T](人胚腎細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
PCR檢測試劑盒 | 人原代造血干原代細(xì)胞293T/17 (STR)人胚腎細(xì)胞 |
PCR檢測試劑盒直銷 | 293T/17 (人胚腎細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
Q熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | 293T/ACE2人胚腎細(xì)胞 |