公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63732 |
細(xì)胞名稱 小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性小耳豬的腎組織。1988年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;4-5天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Volkensiflavone
CAS No.:27542-37-6
中文名:
分子式:C30H20O10
異歐前胡素 訂購(gòu)|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 20mg
訂購(gòu)|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 22.8IU/支
射干 訂購(gòu)|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 1g
馬鞭草 訂購(gòu)|咨詢 蛋白酶1調(diào)節(jié)因子亞基18(PPP1R18) 規(guī)格: 2g
樟腦 訂購(gòu)|咨詢 蛋白酶1調(diào)節(jié)因子亞基1B(PPP1R1B) 規(guī)格: 30mg
單體二聚體 訂購(gòu)|咨詢 蛋白酶3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1) 規(guī)格: 0.5mg
大溶液(1mg/ml) 訂購(gòu)|咨詢 蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α) 規(guī)格: 0.3ml
漢黃芩素 訂購(gòu)|咨詢 蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α) 規(guī)格: 20mg
枸櫞 訂購(gòu)|咨詢 蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2α) 規(guī)格: 200mg
吳茱萸內(nèi)酯(檸檬苦素) 訂購(gòu)|咨詢 隱花色素1(CRY1) 規(guī)格: 20mg
人參二 訂購(gòu)|咨詢 隱花色素2(CRY2) 規(guī)格: 20mg
訂購(gòu)|咨詢 維X受體α(RXRα) 規(guī)格: 100mg
甘草銨 訂購(gòu)|咨詢 維X受體α(RXRα) 規(guī)格: 20mg
無(wú)味B晶型 訂購(gòu)|咨詢 維受體α(RARα) 規(guī)格: 100mg
龍膽(堅(jiān)龍膽) 訂購(gòu)|咨詢 維受體α(RARα) 規(guī)格: 1g
人參皂苷Re 訂購(gòu)|咨詢 維受體β(RARβ) 規(guī)格: 20mg
白當(dāng)歸素; 比克白芷內(nèi)酯; 比克白芷素 訂購(gòu)|咨詢 維受體γ(RARγ) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
草質(zhì)素;蜀葵苷元;蜀葵甙元;3,4′,5 訂購(gòu)|咨詢 維受體應(yīng)答基因1(RARRES1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
BCL2L15 BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Fangchinoline
BTF/BCLAF1 Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Solasurine
Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sparteini Sulfas
Bcl G/BCL2 like 14 Bcl2樣凋亡蛋白14抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml ()Sparteini Sulfas
BOK/Bcl 2 like protein 9 Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Synephrine
Bmf/Bcl2 modifying factor Bcl2蛋白修飾因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Synephrine
A4GALT/CD77 α1,4半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Synephrine HCl
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cephalomannine
基(1十六基)二甲基銨 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:CDAB 含量:IND
基代 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ethylbenzene 含量:AR,99%
基異丁基甲基甲 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:3,5Dimethylhexanol 含量:SP,99.8%
酰 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ethanethioamide 含量:AR
脫氫酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:AldehydeDehydrogenase,potassiumactivated 含量:BR,5′d(NNNNNNNNN)3′
萘酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:αNapthylacetate 含量:超純,98%
萘酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:βNapthylacetate 含量:高純,98%,無(wú)水物
基甲基酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Benzylacetate 含量:1750±50類型
鎘二水合物 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Cadmiumacetatedihydrate 含量:CP,98%
辛酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Octylacetate 含量:AR,98%
小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk麥芽汁培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)規(guī)格:250g用途:標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂,含糖,用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
牛大腸埃希氏菌“o”抗原定型血清規(guī)格:1ml用途:有效期10年
改良EC(MEC+n)肉湯規(guī)格:新生霉素用途:4.5mg每支含量
霉菌酵母菌快檢紙片(污水)規(guī)格:20份/包用途:用于霉菌酵母菌快速檢驗(yàn)
幽門螺旋桿菌固體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。