綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
三葉草根瘤菌說明書 | Rhizobium | EY-J963596 |
資源名稱: 三葉草根瘤菌
種屬: Rhizobium leguminosarum
提供形式: 凍干粉
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領(lǐng)域: 與白三葉草共生固氮,1984年開始在南方各省大面積應用
培養(yǎng)基: 根瘤菌瓊脂 (I):蔗糖 ( 或 )10 克K2HPO4 0.5 克,NaCl0.1 克,酵母膏1 克,檸檬酸鐵 (1%)1 毫升,CaSO40.2 ,MgSO4·7H2O 0.2 克,MnSO 4 (1%)1 毫升,NaMoO4(1%)1 毫升,硼酸 (1%)1 毫升,瓊脂20 克,水1000 毫升,pH6.8 — 7.0
生長條件: 28-30℃,好氧
生長特性: 1、個體形態(tài)特征:桿狀,運動,有鞭毛,有夾膜,革蘭氏陰性,內(nèi)含PHB,裂殖; 2、培養(yǎng)特征:圓形中突菌落,半透明,可以液體培養(yǎng); 3、生理生化特征:化能有機營養(yǎng)型,需氧,不需要光照,PH中性、28攝氏度生長良好,能共生固氮。
存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Ralstonia│mannitolily 中文名稱:解羅爾斯通氏菌Ralstonia│mannitolily分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:820生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Magnetotactic│bacrium 中文名稱:趨磁細菌Magnetotactic│bacrium分離基物:泥樣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:781生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
諾拉彈狀病屬│ 中文名稱:傳染性造血器官壞死病諾拉彈狀病屬│分離基物:病料提供形式:凍存管安全等級:3模式菌株:yes應用領(lǐng)域:基礎(chǔ)研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MEM+5%FBS生長條件:15℃存儲條件:-70 純度:98%
肺病屬│A型 中文名稱:人呼吸道合胞病肺病屬│A型分離基物:病科提供形式:凍存管安全等級:3模式菌株:yes應用領(lǐng)域:基礎(chǔ)研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:EMEM+2%FBS生長條件:37oC存儲條件:-70 純度:98%
Clostridium│botulinum 中文名稱:A型肉梭菌Clostridium│botulinum提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0121生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Lactobacillus│crispatus 中文名稱:卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus分離基物:健康孕婦分泌物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98%
Halobacrium│salinarum 中文名稱:鹽沼鹽桿菌Halobacrium│salinarum分離基物:sald fish提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:212生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Exiguobacrium acetylicum 中文名稱:乙酰微桿菌Exiguobacrium acetylicum分離基物:Creamy was提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:1mol/L THF溶液
三葉草根瘤菌說明書Microsporidia protien 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體尤瑞克林2-乙?;?6-甲氧基吡Human Ep-CAM/CD326 (Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體酶(大腸桿菌)2-乙?;?6-甲氧基吡Human BGN (Biglycan) ELISA Kit
MIDN 中腦核仁蛋白抗體酶(歐文菌)D-半乳糖烯Human NRG-1 (Neuregulin 1) ELISA Kit
Midkine 中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體D-半乳糖烯Human NKA (Neurokinin A) ELISA Kit
MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體5’-胞苷(S)-(+)-扁桃甲酯Human NKB (Neurokinin B) ELISA Kit
MLK3 絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體4'羥基(S)-(+)-扁桃甲酯Human NT (Neurotensin) ELISA Kit
Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281) 磷化絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體5'-羥基吲哚乙3-苯并[b]噻吩-2-甲Human GMFB (Glia Maturation Factor, Beta) ELISA Kit
MYL1/MYL2 肌球蛋白輕鏈1/2抗體馬尿3-苯并[b]噻吩-2-甲Human GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit