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D2D Elisa 試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn)

點(diǎn)擊次數(shù):800次 更新時(shí)間:2019-06-16

   D2D Elisa 試劑盒在的實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測IgM抗體、應(yīng)用親和素和的ELISA。

  D2D Elisa 試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
  應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。
  D2D Elisa 試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的濃度。
  D2D Elisa 試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn):
  (1)進(jìn)鍋不擠壓:擺放待滅菌的菌種袋必須分層,每層菌種袋不可擺太擠,要留一定空隙,不能相互擠壓。不適宜將菌種袋臥疊,要分層立放,以保證蒸汽暢流和接種穴完好。為了避免棉塞易潮濕,可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙,但覆蓋物不可太大,否則會影響上下層蒸汽暢流;也可將4個(gè)菌種袋的棉塞并攏,棉塞向下一同塞到4個(gè)菌種袋的空隙中,這樣塑料袋規(guī)格要加長,但防潮效果良好。
  (2)及時(shí)滅菌:隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時(shí)間越短越好,以免雜菌自繁。大規(guī)模時(shí),要分鍋滅菌。
  (3)攻頭:指開始滅菌時(shí)要大火猛燒。從開始滅菌到溫度達(dá)100℃,歷時(shí)越短越好,zui多不能超過2小時(shí),以免長時(shí)間高溫高濕造成雜菌自繁。當(dāng)然,要做到這一點(diǎn)還取決于滅菌鍋的保溫保氣性能。
  (4)控中間:指鍋體下部溫度達(dá)到100~C后,控制火勢燒穩(wěn)火,維持8~10小時(shí)。此間,溫度不可回落,滅菌操作者要堅(jiān)守崗位,不能因通宵滅菌、疲勞或其他原因而懈怠,引起溫度回落。另外,常壓滅菌為了避免燒干應(yīng)注意及時(shí)向蒸發(fā)鍋內(nèi)補(bǔ)充水,但補(bǔ)水不能造成鍋內(nèi)水停止沸騰,可考慮補(bǔ)充沸水或微量連續(xù)補(bǔ)水??梢姡牍?jié)省燃料,又要做到上述這些,建造一個(gè)保溫、保汽性能良好的滅菌鍋十分重要。
  (5)保尾:指滅菌結(jié)束前要再一次大火猛燒。目的在于加大蒸汽量,滅菌結(jié)束后打開柜門時(shí)有大量蒸汽冒出,帶走棉塞濕氣。但此時(shí)要將連體滅菌鍋中蒸發(fā)鍋內(nèi)的水排干。在開門時(shí)先將門拉開一條縫隙散氣,烘干棉塞,避免冷熱接觸產(chǎn)生冷凝水使棉塞受潮。
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